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亚博取款高效快速_得到完美的色谱图要跳过哪些坑?HPLC谱图常见故障及解决方法!

时间:2021-08-25 00:33:02 作者:亚博取款心丈秒到账 点击:

本文摘要:液相色谱中的许多问题都能在谱图上体现出来,其中有一些问题可以通过转变设备参数获得解决问题;而其他的问题必需通过改动操作程序来解决问题。

液相色谱中的许多问题都能在谱图上体现出来,其中有一些问题可以通过转变设备参数获得解决问题;而其他的问题必需通过改动操作程序来解决问题。对于色谱柱和流动相的准确自由选择是获得好的色谱图的关键。一、拖尾峰1.筛板堵塞,柱子两头的过滤器筛板如果阻塞,样品就不会在筛板部分阻碍而构成时间延迟,使得样品在柱后流入时峰型构成扯尾。必须通过后坐色谱柱,或者替换筛板。

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2.色谱柱坍塌,是指色谱柱由于其它原因引发了柱效率失去,无法对物质构成保有,使得物质不出相同相上保有而随流动互为流入,但是又还有一点柱效,因此构成扯尾。必须新的填满色谱柱或者替换色谱柱。3.有污染,即样品不出同一起跑线费尔南多·阿隆索,从后面开始跑得抵达起点稍早,展现出出有扯尾。替换色谱柱或者使用有机溶剂梯度洗刷1h以上,以冲洗柱子。

4.流动互为PH值自由选择错误,如某PH下有的样品不存在分子型和离子型的动态平衡,离子型的相继向分子型转化成就不会展现出出有扯尾。调节PH值可抑制分子离解,提高扯尾,对于碱性化合物,比较较低的PH值更加不利于获得平面峰。

二、前沿峰1.样品短路,被保有的样品在长时间出峰时间前相继出来,构成前沿峰。减少样品含量。

2.样品溶剂自由选择不合理,当样品溶剂的洗刷能力大大优于流动互为时会经常出现前沿峰,例如,在鼓吹相色谱中用已腈做到样品溶剂,而流动相的洗刷力较强时会经常出现前沿峰。自由选择流动互为或者相似流动相的比例作为样品溶剂。

3.色谱柱损毁,色谱柱柱效损失,无法对物质构成保有。替换色谱柱。4.在大峰前有小峰经常出现,假象前沿峰,即大峰前包埋了没分离的小峰。

调整流动互为洗刷梯度。三、基线漂移1.柱温波动,即使是较小的温度变化都会引发基线的波动,一般来说影响示差检测器、电导检测器、较低灵敏度的紫外检测器或其它光电类检测器。

用于柱温箱,掌控好柱子和流动相的温度,在检测器之前用于热交换器。2.流动相不均匀分布,流动互为条件变化引发的基线漂移小于温度造成的飘移。用于HPLC级的溶剂,流动相在用于前展开脱气处置。

3.流通池被污染或有气体。用甲醇或其他强劲极性溶剂冲洗流通池。

如有必须,可以用1N的硝酸(不要用盐酸)。4.流动十分相似比失当或流速变化。变更用料或流速,为防止这个问题可定期检查流动互为构成及流速。5.样品中有强劲保有的物质,以馒头峰样被洗刷出有,从而展现出出有一个逐步增高的基线。

用于维护柱,如有适当,在进样之间或在分析过程中,定期用强溶剂冲洗柱子。四、经常出现宽峰1.色谱柱污染或过热,导致塔板数减少。

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替换某种程度类型的色谱柱,如果新的柱子可以获取平面的色谱峰,则用强溶剂冲洗原有柱子。2.柱子与检测器之间的管路太长或管路内径过于大。替换内径较小的短管路。

3.检测器对反应时间或池体积号召过大。增加响应时间或用于更加小的流通池。五、基线噪音1.在流动互为、检测器或泵中有空气(锐利峰)。

流动互为脱气,冲洗系统以除去检测器或泵中的空气。2.漏液。

检查管路连接器否断裂,泵否漏液,否有盐两县和不长时间的噪音。如有适当,替换泵密封。3.流动互为混合不几乎。用手晃动使混合均匀分布或用于低粘度的溶剂。

4.温度影响(柱甘过低,检测器并未冷却)。用于柱温箱,增加温度差异或再加热交换器。5.在同一条线上有其他电子设备(无意间噪声)。

插入LC、检测器和记录仪,检查阻碍否来自于外部,加以修正。使用仪器级稳压电源。六、分离出来度过于1.流动互为梯度洗刷设置不合理。

优化梯度洗刷程序。2.流动互为污染或变质(引发保有时间变化)。重新配置流动互为。3.维护柱或分析柱堵塞。

去除维护柱展开分析,如果适当则替换维护柱;如果分析柱堵塞,可展开后坐;如果问题依然不存在色谱柱有可能被强劲保有的污染物损毁,建议用于合理的再造程序;如果问题依然不存在,进口有可能堵塞了,替换入口处的筛板或替换色谱柱。


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